الفحص المجهري الفلوري وتصوير الخلايا

يعتبر الفحص المجهري أساس فهم بنية الأنسجة ، وهيكل الخلية وديناميكياتها ، بالإضافة إلى الوظيفة الجزيئية. يستخدم الفحص المجهري الفلوري بشكل روتيني لتحديد المعلومات المكانية والطوبولوجية حول الخلايا والأنسجة. تتيح الأجهزة المجهرية المسح بالليزر المتطورة والكاميرات الرقمية فائقة الحساسية ومسبارات التألق المتخصصة تصور الأحداث الخلوية في الوقت الفعلي وصولاً إلى المستوى الجزيئي.

مجهر مضان قيد الاستخدام

تعمل الموارد المشتركة بين المجهر الفلوري والتصوير الخلوي على تعزيز التميز في أبحاث السرطان من خلال توفير أحدث الأجهزة والبرمجيات للتصوير الكمي متعدد المقاييس ومتعدد الوسائط.

تعزيز التميز في أبحاث السرطان

صورة النويرونيساعد الفحص المجهري الفلوري والتصوير الخلوي في الموارد المشتركة الباحثين الأساسيين والأطباء على تصوير عينات ونشر مقالات رفيعة المستوى:

  • توضيح الآليات الخلوية والجزيئية للسرطان والأمراض المناعية والمعدية والاستقلابية والعصبية والأوعية الدموية
  • تقييم الفعالية العلاجية في الخلايا وعينات المرضى
  • اختبر تقنيات النانو الجديدة في الاختبارات القائمة على الخلايا
  • قياس التغيرات في مورفولوجيا الأنسجة وعلم الأمراض كمياً

يوفر المصدر المشترك للمجهر الفلوري والتصوير الخلوي للباحثين في UNM إمكانية الوصول إلى أحدث الأجهزة لتقنيات التألق المتعدد وتقنيات الفحص المجهري للضوء المنقولة:

  • يتيح المسح بالليزر للمجاهر الفردية ومتعددة الفوتونات وأنظمة التصوير الفائق الطيفي التصور المتزامن والقياس الكمي للبقع الكيميائية النسيجية وعلامات الفلورسنت
  • تطبيقات التألق الانعكاسي الداخلي الكلي (TIRF) وتتبع الجسيمات الفردية (SPT) والفحص المجهري لتوطين الجزيء الفردي (SMLM) لتحديد أحداث الخلايا الحية الديناميكية وتحقيق دقة أقل من حد الانعراج للضوء
  • يسمح التصوير بالقياس الكمي للتغيرات في الوقت الحقيقي في الكالسيوم وتركيزات الأيونات الأخرى استجابة لإشارات الخلية 

يحتوي المجهر المجهري الفلوري والتصوير الخلوي على طاقم عمل يقدمه المحققون:

  • استشارة الخبراء حول تصميم التجربة وإعداد العينات 
  • التدريب
  • التصوير مقابل رسوم
  • مساعدة مستمرة

ديان ليدكي ، دكتوراه ؛ مدير الكلية

قسم علم الأمراض
2325 كامينو دي سالود ، CRF203A
مركز UNM الشامل للسرطان
البوكيرك ، نيو مكسيكو 87131
الهاتف: (505) 272-8375

إرسال بريد إلكتروني إلى د. ديان ليدكي

مايكل بافيت ، دكتوراه ؛ المدير الفني

2325 كامينو دي سالود ، CRF201A
مركز UNM الشامل للسرطان
البوكيرك ، نيو مكسيكو 87131
Phone: 505-272-1437

إرسال بريد إلكتروني إلى د. بافيت

كيث ليدكي ، دكتوراه ؛ مستشار خاص

210 ييل بوليفارد إن ، 2218
الفيزياء وعلم الفلك مبنى العلوم متعدد التخصصات
البوكيرك ، نيو مكسيكو 87106
الهاتف: (505) 277-2616

راسل د. كيث ليدكي

للإقرار باستخدام هذا المورد المشترك ، يرجى تضمين ما يلي في منشوراتك:

تم دعم هذا البحث جزئيًا من خلال منحة UNM الشاملة لدعم مركز السرطان NCI P30CA118100 واستفاد من المورد المشترك للتصوير المجهري والتصوير الخلوي.

بعد النشر ، من فضلك أرسل لنا واحدة من النسخ أو صور الغلاف لسجلاتنا.

الأجهزة الدقيقة

الموقع: CRF219

تفاصيل نظام

  • مجهر مقلوب أوليمبوس IX83 المخصص مع مرحلة مسح بيزو Asylum 3D XYZ
  • مصباح LED متعدد الأطياف Excelitas Turbo (مجال واسع) ومصباح هالوجين (مجال مشرق)  
  • 10x / 0.3NA ، 20X / 0.7NA و 100 X / 1.4NA هدف الغمر بالزيت
  • كاميرا أوليمبوس XM10 أحادية اللون CCD 
  • Asylum MFP Origin AFM رئيس مع نطاق سفر ممتد للمستحضرات البيولوجية
  • برنامج بحث اللجوء لضوابط AFM
  • برنامج Olympus cellSens للتحكم في الفحص المجهري الضوئي
  • BioHeater للعمل مع الخلايا الحية / الأنسجة
  • يتم توفير مجسات التدريب حتى نفاد الكمية!
  • الأطباق المتوافقة مع AFM: تغطي WillCo الغرف السفلية (Ted Pella cat # 14025-20) و BD Falcon (# 351006) أطباق ثقافة البوليسترين
  • يمكن العثور على الأسطح المسطحة ذريًا (الميكا أو HOPG) للمسح عالي الدقة على Ted Pella.com - يرجى الاستفسار للحصول على المساعدة

التطبيقات الممكنة

  • تبديل وضع الاتصال (AC)، ويعرف أيضًا باسم وضع التنصت ، للتصوير بمقياس نانومتر في الاستعدادات الجافة أو الرطبة
  • وضع الاتصال لقياسات القوة الميكانيكية (معامل المرونة ، التصاق ، المسافة البادئة ورسم خرائط القوة) في التجهيزات الجافة أو الرطبة 

الموقع: CRF216

تفاصيل المجهر

  • مجهر Leica DMi8 مقلوب بمرحلة آلية XY
  • مصباح الفلورسنت المعدني هاليد ومصباح انتقال الهالوجين
  • 10x ، 20X زيت ، 25X ماء ، 63X ماء DIC و 63X زيت DIC
  • الإثارة بالليزر لـ PA-GFP و DAPI و CFP و YFP و FITC و Rhodamine و Cy5-like fluorophores
  • ليزر الضوء الأبيض النابض والمتناغم: 470 - 670 نانومتر
  • ليزران إضافيان: 405 نانومتر ديود ليزر ومتعدد الأرجون (458 ، 477 ، 488 ، 514 خطوط نانومتر)
  • ستة كاشفات: كاشفان طيفيان هجينان (HyD) ؛ 2 طيفي SMD ** HyDs ، 2 PMT طيفي قياسي و 1 PMT مرسلة (خارجي)
  • Galvo Z- المرحلة
  • ماسح الرنين
  • وحدة الفحص المجهري مدى الحياة (FLIM) من بيكو هارب 300
  • برنامج اقتناء LASX
  • SymphoTime64 (PicoQuant) برنامج FLIM
  • برنامج Huygens Deconvolution
  • حاضنة توكاي هيت أعلى المرحلة لتصوير الخلايا الحية

* HyDs هي أجهزة كشف متخصصة تستخدم كاثودات GAsP والصمامات الثنائية الضوئية

** كاشفات جزيء واحد (SMD)

التطبيقات الممكنة

  • تم تثبيت العينات الثابتة على شريحة قياسية مع قسائم غطاء # 1.5
  • عينات الخلايا الحية (LabTekII # 1.5 متعدد الآبار أو 35 مم (# 1.5) غطاء قاع)
  • FLIM FRET (ثابت أو خلية حية)
  • تبيض متقبل الحنق (ثابت)
  • انبعاث فريت الحساس (خلية حية)
  • FRAP (خلية حية)
  • اكتساب ثلاثي الأبعاد (Z-Stacks) وتصوير الفاصل الزمني
  • متعدد الأطياف فك
  • مسح مساحة كبيرة ، متعدد الأبعاد للبلاط
  • دقة فائقة عبر معالجة استعادة الصورة (~ 130 نانومتر)

الموقع: CRF226

تفاصيل المجهر

  • مجهر مقلوب Zeiss AxioObserver بمرحلة آلية XY
  • مصباح الفلورسنت الهاليد المعدني ومصباح نقل الهالوجين
  • 10x ، 20x ، 40x زيت ، 63x زيت و 63x أهداف غمر بالمياه
  • تتوفر مدينة دبي للإنترنت بأهداف 10x و 20x و 40x و 63x
  • الإثارة بالليزر لـ PA-GFP و DAPI و CFP و YFP و FITC و Rhodamine و Cy5-like fluorophores
  • أربعة ليزر الحالة الصلبة: 405 نانومتر ، 488 نانومتر ، 561 نانومتر ، 640 نانومتر
  • الكشف عن القناة والطيف - كاشفات GaAsP PMT
  • الكشف المتزامن في 3 قنوات متوفرة في وضع القناة
  • كاشف صفيف Airyscan لزيادة 1.7X في دقة XY
  • كاشف الضوء المنقول
  • نظام حضانة الخلايا الحية: التحكم في درجة الحرارة والرطوبة وثاني أكسيد الكربون
  • برنامج Zen Blue Image Acquisition

التطبيقات الممكنة

  • تم تثبيت العينات الثابتة على شريحة قياسية مع قسائم غطاء # 1.5
  • عينات الخلايا الحية (LabTekII # 1.5 متعدد الآبار أو 35 مم (# 1.5) غطاء قاع)
  • تبيض متقبل الحنق (ثابت)
  • انبعاث فريت الحساس (خلية حية)
  • FRAP (خلية حية)
  • اكتساب ثلاثي الأبعاد (Z-Stacks) وتصوير الفاصل الزمني
  • متعدد الأطياف فك
  • مسح مساحة كبيرة ، متعدد الأبعاد للبلاط
  • دقة فائقة عبر معالجة استعادة الصورة (~ 130 نانومتر)

الموقع: CRF226

تفاصيل المجهر

  • مجهر مقلوب أوليمبوس IX83 المخصص مع مرحلة XY بمحرك ASI مع ملحق بيزو Z.
  • LED متعدد الأطياف Excelitas Turbo (مجال واسع) و Lumencor أبيض LED (مجال مشرق)  
  • زيت 20x / 0.8NA و 60x / 1.5NA oil TIRF و 60x / 1.2NA water و 100x / 1.4NA oil
  • مدينة دبي للإنترنت قادرة على البصريات 60x و 100x.
  • أداة التحكم في الوقت الحقيقي من أوليمبوس لمزامنة دقيقة للكاميرا والإثارة
  • 4 خط ليزر MITICO TIRF إنارة لأعماق ثنائيات مستقلة
  • 4 خطوط ليزر فردية لـ TIRF: 405 نانومتر (100 ميجا واط) ؛ 488 نانومتر (100 ميجا واط) ؛ 561 نانومتر (100 ميجاوات) و 640 نانومتر (140 ميجاوات)
  • الفحص المجهري لإعادة البناء البصري العشوائي المباشر (dSTORM) ، الفحص المجهري الموضعي النشط ضوئيًا (PALM) وتصوير الألواح الضوئية الصفائحية المائلة للغاية (HILO)
  • كاميرا Hamamatsu Fusion sCMOS وموزع صور Geminini W-View للحصول على 2 لون متزامن من الخلايا الحية.
  • تركيز بؤري تلقائي غير مدمر للضوء IR ZDC2 للحصول على لقطة واحدة سريعة للغاية أو إمكانيات ضبط تلقائي للصورة مستمرة 
  • سخان موضوعي BiopTechs لتطبيقات الخلايا الحية قصيرة المدى
  • برنامج الحصول على صورة أوليمبوس cellSens Dimension

التطبيقات الممكنة

  • العينات الثابتة مع قسائم غطاء # 1.5H
  • عينات الخلايا الحية (LabTekII # 1.5H متعدد الآبار أو 35 مم (# 1.5H) غطاء أسفل)
  • اكتساب ثلاثي الأبعاد (Z-Stacks) وتصوير الفاصل الزمني
  • تتضمن التطبيقات المحددة الكشف عن الجزيء الفردي TIRF للخلية الحية أو HILO أو 2D dSTORM أو PALM 
  • تم تمكين GPU للمعالجة اللاحقة المقدمة من Huygens Localizer

موقع الكاميرا: CRF218

تفاصيل المجهر

  • مجهر مقلوب أوليمبوس IX-71
  • مصباح الفلورة الزئبقي ومصباح نقل الهالوجين
  • أحادي اللون - نطاق الإثارة 350nm-670nm
  • الليزر: 405 نانومتر ، 488 نانومتر ، 520 نانومتر و 642 نانومتر
  • 20x ، 60x H2O ، 100x زيت ، 150x Oil TIRF
  • مرشحات الإسفار لـ Quantum Dots و DAPI و FITC و Rhod-like fluorophores و Fura-2 و Indo-1
  • برنامج Andor IQ Image Acquisition
  • أجهزة التسخين وعلم الأمراض الموضوعية نظام حضانة الخلايا الحية مع ثاني أكسيد الكربون والحرارة والرطوبة
  • المرحلة الآلية XYZ
  • كاميرا Andor iXon EM-CCD
  • مقسم صورة مقسم بصري (مزدوج)

التطبيقات الممكنة

  • عينة ثابتة مثبتة على الشرائح
  • تصوير الخلية الحية مع دفئ موضوعي
  • تتبع الجسيمات الفردية
  • مضان الانعكاس الداخلي الكلي (TIRF)
  • التصوير المتري النسبي (الإثارة المزدوجة / الانبعاث الفردي أو الإثارة الفردية المزدوجة)
  • الخلايا الحية في الثقافة
  • Widefield Fluorescence - العديد من الفلور ممكن مع أحادي اللون
  • Z- مكدسات وسلسلة زمنية

موقع الكاميرا: CRF224

تفاصيل المجهر

  • مجهر عمودي AxioPlanMOT
  • مصباح الفلورسنت المعدني هاليد ومصباح انتقال الهالوجين
  • 10x ، 20x ، 40x زيت و 63x أهداف زيت
  • مرشحات تمرير طويلة DAPI و FITC و Rhodamine و Cy5 للاستخدام مع كاميرا Nuance وكاميرا Nuance الطيفية والبرامج
  • فتحة الأنف الآلية ، المرحلة Z ، برج الفلتر والغالق لسهولة التشغيل.

التطبيقات الممكنة

  • عينة ثابتة مثبتة على الشرائح
  • Widefield fluorescence - عينة مسماة بـ DAPI و FITC و Rhod و Cy5-like fluorophores
  • Brightfield - H&E ، DAB ، Giemsa ، إلخ.
  • يمكن استخدام الكاميرا الطيفية الدقيقة لفصل الفلوروفورات المتداخلة عن كثب ، والبقع الكيميائية النسيجية ، وتمييز التألق الذاتي وتحديد العلامات الكمية

موقع الكاميرا: CRF212

تفاصيل المجهر 

  • زايس AxioObserver مجهر مضان مقلوب
  • كاميرا Hamamatsu ORCA Flash4.0v2 sCMOS أحادية اللون (100 إطار في الثانية بدقة كاملة 2048 × 2048)
  • مصباح الفلورسنت الهاليد المعدني ومصباح نقل الهالوجين
  • 10x ، 20x ، 63xDIC Oil ، و 100x Oil
  • تباين الطور لأهداف 10x و 20x
  • تتضمن مجموعات المرشحات الفلورية: DAPI و FITC و Rhodamine / TRITC / Cy3 و Texas Red و Cy5
  • مدينة دبي للإنترنت متوفرة بأهداف 63x
  • سخان موضوعي (هدف مائي 63x) o قطعة أنف آلية للتكديس على شكل Z
  • مرحلة XY الآلية للحصول على صورة متعددة المواضع (تصوير بفاصل زمني ثابت أو خلية حية)
  • برنامج الحصول على الصور SlideBook6

التطبيقات الممكنة 

  • عينة ثابتة مثبتة على الشرائح
  • خلايا حية في طبق ساترة / تدفئة مع سخان موضوعي
  • مدينة دبي للإنترنت (غير متحد البؤر) مع أهداف 63x ، مدمجة مع مضان أو بمفردها
  • Z- مكدسات ، مونتاج ، وتصوير السلاسل الزمنية

موقع الكاميرا: CRF226

تفاصيل المجهر

  • مجهر عمودي AxioSkop 2 MOT
  • 4x ، 10x ، 20x ، 40x ، 40x زيت و 63x زيت
  • تباين الطور لأهداف 10x و 20x
  • كاميرا ملونة رقمية AxioCam HR
  • برنامج الحصول على الصور Zeiss AxioVision
  • المرحلة Z الآلية

التطبيقات الممكنة

  • عينة ثابتة مثبتة على شرائح للتشريح المرضي العام
  • Brightfield - H&E ، DAB ، Giemsa ، إلخ.

تقع في CRF224 و CRF226

تطبيقات الكمبيوتر

  • هويجنز ديكونفوليوشن ساينتيفيك فوليوشن للتصوير (1)
  • سلايد بوك (1)
  • محقق ستيريو (1)
  • نيورولوسيدا (1)
  • LASX (لايكا متحد البؤر) (1)
  • IQTL (تحليل ماسح الأعاصير) (1)
  • زين (2)  
  • LSM510 (2)
  • برنامج التصوير الطيفي Nuance (2)

خيارات التحليل

  • التعريب المشترك
  • تفكيك
  • فك الطيف
  • تحليل الشدة
  • التحليل الصرفي
  • تقديم شمومكسد
  • عد الكائنات
  • تتبع الجسيمات
  • التحضير للنشر

تقع في CRF214

Typhoon FLA 7000 هو ماسح ضوئي بالليزر سريع ومتعدد الاستخدامات لتطبيقات التصوير الجزيئي الحيوي بما في ذلك:

  • القياسات الحساسة والكمية للتسميات النظائر المشعة
  • لطخات غربية كيميائية
  • مضان واحد (الإثارة المرئية)
  • توثيق البقع اللونية (على سبيل المثال ، المواد الهلامية المطلية باللون الأزرق والفضي Coomassie)

تقع في CRF214

Li-Cor Odessey Fc هو ماسح ضوئي بالقرب من الأشعة تحت الحمراء (680 نانومتر و 740 نانومتر) لتطبيقات التصوير الجزيئي الحيوي بما في ذلك:

  • القياسات الحساسة والكمية للبقع الغربية المتوهجة كيميائيًا
  • توثيق البقع اللونية (على سبيل المثال ، المواد الهلامية المطلية باللون الأزرق والفضي Coomassie)

تشمل خدمات الفحص المجهري

  • استشارة الخبراء حول تصميم التجربة وإعداد العينات
  • تدريب المستخدم
  • ساعد المشغل في التصوير والحصول على البيانات الأولية لطلبات المنح
  • بيت مفتوح سنوي لإبلاغ المستخدمين بالتحديثات على الأجهزة والتقنيات والتطبيقات الجديدة
  • دورة الفحص المجهري لطلاب الدراسات العليا والزملاء في البصريات ووظائف الأجهزة
  • ورش العمل السنوية التي تمنح المستخدمين الجدد تدريبًا عمليًا في إعداد العينات

استرجاع FasLGFP الاستحواذ_20201113_165
إجمالي تألق الانعكاس الداخلي (TIRF) لتعبير نشاط FasL-GFP القاعدية في خلايا RBL

خدمات الفحص المجهري والأسعار

Zeiss AxioSkop - كاميرا ملونة AxioCamHR: 10 دولارات في الساعة

Zeiss AxioObserver - Hamamatsu ORCA Flash4.0v2 sCMOS أحادية اللون الكاميرا: 18 دولارًا / ساعة

Zeiss AxioPlan2 - كاميرا Nuance متعددة الأطياف: 10 دولارات في الساعة

نيكون TE2000 - كاميرا Q-Imaging Retiga R3 أحادية اللون: 10 دولارات في الساعة

لايكا TCS SP8 متحد البؤر مع كشف جزيء واحد / FLIM: 54 دولارًا / ساعة

Zeiss LSM 800 AiryScan: 50 دولارًا في الساعة

تتبع الجسيمات الفردية / تصوير نسبة الإسفار (Rm. 218): 25 دولارًا / ساعة

نظام ستريولوجي متحد البؤر (Rm. 212): ٤٠ دولار/ساعة

مجهر القوة الذرية (219 رينغيت ماليزي): 30 دولارًا / ساعة

تصوير Epi-fluorescence: 75 دولارًا / ساعة

التصوير الفلوري متحد البؤر: 100 دولار / ساعة (4 ساعات)

مجهر أوليمبوس والتصوير الطيفي: 75 دولارًا / ساعة (2-6 ساعات)

جميع طرق التصوير: 105 دولار / ساعة

تمويل التسهيلات

تقر جامعة نيو مكسيكو ومركز السرطان المشترك المجهري الفلوري بالتمويل التالي لشراء الأجهزة أو دعم المنشأة منذ افتتاحها في عام 1999.

التمويل الحالي

NCI 2P30 CA118100 (PI Willman، C.) "منحة دعم مركز السرطان UNM" 9/25 / 05-8 / 31/20

NIGMS 5P50 GM085273 (PI Wilson، BS) "مركز النمذجة الزمانية المكانية لشبكات تشوير الخلايا (STMC)" 08/01 / 08-07 / 31/19

STMC P50GM085273: دعم تمويل لايكا TCS-SP8 و Olympus iX71

تمويل الأجهزة السابقة

NCRR 1 S10 RR14668 (PI Wandinger-Ness، A.) "مجهر متحد البؤر LSM510 من Zeiss لبحوث العلوم الصحية" 04/01 / 00-03 / 31/01

NSF MCB9982161 (PI Wandinger-Ness ، A.) "وظيفة بروتين Rab7 والإكسسوار في الالتقام المتأخر" (شراء كاميرا هاماماتسو الرقمية لتصوير الخلايا الحية) 04/01 / 00/03/31

NCRR S10 RR016918 (PI Wandinger-Ness، A.) "Zeiss Axiovert 200 لمشروع التصوير بالخلايا الحية" 08/01 / 02-04 / 01/04

NCRR S10 RR19287 (PI Wandinger-Ness، A.) "كاشف META و 405 نانومتر ليزر" 04/01/04/03/31/05

NCRR 1S10RR025540 (PI Wandinger-Ness، A.، co-I Lee، R.) "مجهر مجسم متحد البؤر لـ UNM's Fluorescence Microscope Core" ARRA 05/01 / 09-03 / 31/10

NSF DGE-0549500 (PI Osinski، M. co-I، Oliver Co-PI) "تقنية النانو لبيولوجيا الخلايا وعلم الأعصاب" (شراء ملحقات لـ Olympus IX71) 6/15 / 06-5 / 31/11

صندوق عائلة ماثيوز (PI Lee، R.) "Nuance Spectral Imaging System، Cri" 01/01 / 09-12 / 31 / -09

NIDDK 3R301 DK050141 (PI Wandinger-Ness، A.) "الآليات المرضية لمرض الكلى المتعدد الكيسات" شراء مراقب Zeiss Axio لـ 510 META) الملحق الإداري ARRA 09/30 / 09-09 / 29/11

NCRR P20 RR11830 (PI Oliver، J.، co-PI Eaton، P.) "تعزيز البحث متعدد التخصصات في نيو مكسيكو" 9/30/96 - 9/29/99

NCI R24 CA88339 (PI Sklar، L.) "مورد مشترك لأبحاث السرطان UNM" 07/01 / 00-06 / 30/05

NCI P20 CA88807 (PI Willman، C.) "منحة تخطيط مركز السرطان بجامعة نيو مكسيكو" 07/01 / 00-06 / 30/05

التمويل الداخلي 1999 - حتى الآن: 437,266 XNUMX دولار

مركز العلوم الصحية بجامعة نيو مكسيكو

مركز السرطان بجامعة نيو مكسيكو

كلية الطب بجامعة نيو مكسيكو ، قسم علم الأمراض